Natrio citrato buferis dažnai naudojamas RNR izoliuoti, nes jis sumažina RNR gijų bazinę hidrolizę, todėl jis yra neįkainojamas mRNR gryninimo metu. genomo mokslinius tyrimus ir transkripcijos studijas. Citrinų buferiai taip pat padeda nustatyti antigenus fiksuotuose audinių preparatuose, nes jie nutraukia kryžminius ryšius, susiformavusius tarp antigenų ir fiksavimo terpės.
Atlikus šiuos paprastus veiksmus, per 10 minučių galima sukurti natrio citrato buferį, kurio pH 6 (rūgštus).
Natrio citrato buferio medžiagos
Natrio citrato buferiui gaminti reikia nedaug medžiagų. Su citrinos rūgštimi reikia tik 1 M natrio hidroksido, distiliuoto vandens ir kalibruoto pH zondo. Natrio citratas yra neprivalomas.
Buferiui gaminti taip pat reikia 1 litro matavimo cilindro, 1 litro matavimo kolbą ir tris 1 litro terpės butelius. Galiausiai jums reikės magnetinės maišymo juostos ir magnetinio maišiklio. Visą šią medžiagą galima rasti mokykloje, darbo vietų laboratorijos arba nusipirkite internetu arba specializuotų prekių parduotuvėse.
Dvi buferio sudarymo galimybės
Atsižvelgiant į jums prieinamas medžiagas, yra du natrio citrato buferių gamybos būdai.
- Jei turite ir citrinos rūgšties, ir konjuguotos bazės, sukurkite pradinį kiekvieno tirpalą, sumaišydami 21 g citrinos rūgšties 1 litre distiliuoto vandens ir 29,4 g natrio citrato 1 litre distiliuoto vandens.
- Jei turite tik citrinos rūgšties po ranka, sumaišykite 2,1 gramo šiek tiek mažiau nei 1 litre distiliuoto vandens.
Citrinos rūgšties ir natrio citrato tirpalų sumaišymas
Sumaišykite 82 mililitrus citrinos rūgšties tirpalo su 18 mililitrų natrio citrato tirpalo. Įpilkite pakankamai distiliuoto vandens, kad mišinio tūris būtų šiek tiek mažesnis nei 1 litras.
PH nustatymas
Švelniai maišant tirpalą magnetiniu maišikliu, naudokite 1 M natrio hidroksido mišinį, kad sureguliuotumėte mišinio pH iki 6,0. Tada su matavimo kolba įpilkite daugiau distiliuoto vandens, kad galutinis bendras tirpalo tūris būtų tiksliai 1 litrų.